721可見分光光度計(jì)是實(shí)驗(yàn)室定量分析的基礎(chǔ)設(shè)備,其測量精度直接影響實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可靠性。定期校準(zhǔn)能修正儀器漂移、光路偏差等問題,而科學(xué)的校準(zhǔn)方法是保障精度的關(guān)鍵,以下從校準(zhǔn)周期與具體方法兩方面展開說明。?
校準(zhǔn)周期需結(jié)合使用頻率與場景確定。依據(jù)《JJG 178-2007紫外、可見、近紅外分光光度計(jì)檢定規(guī)程》,常規(guī)使用場景下(每周使用3-5次),
721可見分光光度計(jì)需每12個(gè)月進(jìn)行一次全面校準(zhǔn);若用于高頻率檢測(每日使用或連續(xù)運(yùn)行),或處于高溫、高濕(濕度>75%)、多塵環(huán)境,校準(zhǔn)周期應(yīng)縮短至6個(gè)月;若設(shè)備出現(xiàn)異常(如讀數(shù)波動(dòng)大、基線漂移嚴(yán)重),或經(jīng)過維修(如更換光源、光電管),需立即停機(jī)校準(zhǔn),不可繼續(xù)使用。此外,每次重要實(shí)驗(yàn)前,建議進(jìn)行簡易校準(zhǔn)(如基線校準(zhǔn)),確保儀器處于正常狀態(tài)。?
校準(zhǔn)方法需按步驟規(guī)范操作,核心圍繞“基線、波長、吸光度”三大指標(biāo)。?
第一步是基線校準(zhǔn),這是基礎(chǔ)前提。開機(jī)預(yù)熱30分鐘(待光源與電路穩(wěn)定),將波長調(diào)至550nm(可見光中間波段),放入空白對照液(如蒸餾水,需與待測液溶劑一致),調(diào)節(jié)“0%T”(透光率)旋鈕使讀數(shù)為0,再調(diào)節(jié)“100%T”旋鈕使讀數(shù)為100%;隨后在200-800nm波長范圍內(nèi),每隔50nm重復(fù)上述操作,確保全波段基線平直(透光率偏差≤±0.5%),若某波段偏差過大,需檢查比色皿是否潔凈、光路是否有遮擋。?
第二步是波長準(zhǔn)確度校準(zhǔn),關(guān)鍵在于修正波長偏差。采用標(biāo)準(zhǔn)濾光片(如重鉻酸鉀溶液,在440nm、530nm、575nm處有特征吸收峰),將波長從低到高緩慢調(diào)節(jié)至特征峰理論值,記錄實(shí)際吸收峰值對應(yīng)的波長,計(jì)算偏差:若偏差≤±2nm,符合要求;若偏差超范圍,需打開儀器蓋板,微調(diào)波長調(diào)節(jié)螺桿(順時(shí)針波長增大,逆時(shí)針減小),反復(fù)校準(zhǔn)至偏差達(dá)標(biāo)。?
第三步是吸光度準(zhǔn)確度校準(zhǔn),保障定量分析精度。使用已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液(如0.02mol/L重鉻酸鉀硫酸溶液,在350nm處吸光度為0.535),放入比色皿后讀取吸光度值,與理論值對比,相對誤差需≤±2%;同時(shí)進(jìn)行重復(fù)性校準(zhǔn):連續(xù)測量同一標(biāo)準(zhǔn)溶液5次,吸光度較大值與較小值之差≤0.005,若重復(fù)性差,需檢查比色皿配對性(將4個(gè)比色皿裝入空白液,吸光度差值應(yīng)≤0.002,不合格者剔除)。?
校準(zhǔn)完成后,需填寫校準(zhǔn)記錄(包括日期、校準(zhǔn)人員、各指標(biāo)偏差、調(diào)整措施),并粘貼校準(zhǔn)合格標(biāo)簽。若校準(zhǔn)后仍不達(dá)標(biāo),需聯(lián)系專業(yè)維修人員,不可自行拆解核心部件(如單色器、光電倍增管)。遵循規(guī)范的校準(zhǔn)周期與方法,能讓721可見分光光度計(jì)長期保持±0.5%的吸光度精度,為生化、環(huán)保、食品等領(lǐng)域的定量分析提供可靠數(shù)據(jù)支撐。